熒光標記時,肽和修飾標記的染料之間需要加一個間隔嗎?
多數染料屬于大分子量芳香族氨基酸,在多肽中引入這一類大型分子,為了避免多肽與標簽之間發生相互作用,維持蛋白的構象及其生物學活性,我們推薦引入一個可彎曲的間隔區,比如Ahx, Ahx是一個含有6碳分子的環狀結構,可以維持熒光標簽的穩定性。否則,FITC很容易結合多肽序列中的半胱氨酸殘基或者賴氨酸殘基。
通常情況下,生物素、FITC一類的染料既可以標記在蛋白的氨基端也可以標記在蛋白的羧基端。然而,為了在*短時間內,*便捷又高效地合成多肽,***推薦客戶選擇標記在氨基端。因為一個多肽的合成往往是從羧基端開始的,這樣一來,氨基端的修飾便成為*后一個環節,不需要再進行特別的結合作用。反之,羧基端修飾需要額外的環節,因此過程更加復雜。